在荧光成像与生物分子标记的科研领域，Cy5 - 伯胺正以 “高性能荧光探针” 的身份，成为解析蛋白质相互作用、细胞动态追踪及活体成像的 “精准标记工具”！这种将 Cy5 荧光基团与伯胺（-NH?）活性基团结合的化合物，凭借优异的近红外荧光性能与高效反应活性，从生物分子共价标记到复杂体系成像分析，为科研人员提供 “高灵敏度、低背景、强穿透” 的荧光示踪方案，让隐藏的生物过程在近红外光下无所遁形！
分子特性：荧光标记的 “性能双核心”
Cy5 - 伯胺的核心优势源于荧光性能与反应活性的完美协同：
近红外荧光 “利器”：激发波长 649nm，发射波长 670nm，处于生物组织透光窗口（650-900nm），光散射与自发荧光干扰极低（信噪比＞50:1），荧光量子产率达 0.28，亮度是传统荧光染料的 1.5-2 倍，且光稳定性优异（连续照射 1 小时荧光保留率＞80%）；
高效共价标记能力：伯胺基团可与醛基、羧基（需活化）、异氰酸酯等发生特异性反应，在温和条件下（pH 7-9，室温）即可实现对蛋白质、多肽、抗体、多糖等生物分子的共价标记，标记效率＞90%，且不影响生物分子活性；
结构兼容性灵活：伯胺基团可通过碳链 linker 与 Cy5 连接（常见 linker 长度 2-10 个碳），减少荧光基团对生物分子空间构象的干扰，适配不同分子量（1kDa-200kDa）生物分子的标记需求。
三大核心科研应用场景：从分子标记到活体成像
1. 生物分子特异性标记与检测
在蛋白质组学与分子互作研究中：
蛋白质定点标记：通过伯胺与蛋白质表面赖氨酸残基的反应，实现抗体、酶等蛋白的 Cy5 标记，标记后蛋白活性保留率＞95%，在 Western blot 实验中，可替代传统 HRP 显色，检测灵敏度达 pg 级，且无背景干扰；
核酸探针标记：与氨基修饰的 DNA/RNA 探针反应，制备 Cy5 标记核酸探针，用于荧光原位杂交（FISH），在细胞染色体定位实验中，荧光信号清晰，可分辨 500bp 以下的基因片段，信号强度是荧光素标记的 3 倍。
2. 细胞与亚细胞水平动态成像
在细胞生物学可视化研究中：
细胞内靶点追踪：标记细胞穿透肽（CPP）或受体靶向肽，通过伯胺反应构建 Cy5 - 肽探针，实现对细胞内特定靶点（如肿瘤细胞表面受体）的动态追踪，在共聚焦显微镜下，可清晰观察探针从细胞膜内吞到细胞器定位的全过程，时间分辨率达秒级；
细胞器功能分析：与细胞器特异性抗体（如线粒体抗体）偶联，制备 Cy5 - 抗体复合物，用于活细胞细胞器动态观察，在细胞凋亡实验中，可实时监测线粒体形态变化，荧光信号稳定，避免了传统染料的细胞毒性（孵育 24 小时细胞存活率＞90%）。
3. 活体成像与药物递送研究
在体内示踪与转化医学研究中：
活体组织分布成像：标记纳米药物载体（如脂质体、聚合物胶束），利用 Cy5 的近红外穿透性，通过活体成像仪追踪载体在小鼠体内的分布与代谢，在肿瘤靶向递送研究中，可清晰观察到药物在肿瘤部位的富集，信号持续时间＞48 小时；
生物分子相互作用可视化：通过 Cy5 - 伯胺标记的配体与受体结合，利用荧光共振能量转移（FRET）技术，在活体层面验证蛋白 - 蛋白相互作用，在免疫检查点分子（如 PD-1/PD-L1）研究中，可实时监测两者结合的动态过程，为免疫治疗机制解析提供直接证据。
实验数据参考：标记效率与成像性能实证
标记效率：1mg/mL 抗体与 10 倍摩尔比的 Cy5 - 伯胺在 37℃反应 2 小时，标记率达 92%，SEC-HPLC 检测显示无游离染料残留，抗体结合活性与未标记组无显著差异；
细胞成像：Cy5 标记的 EGF 与 A431 细胞孵育 30 分钟，共聚焦成像显示荧光主要富集于细胞膜（平均荧光强度 3500 AU），胞内背景仅 200 AU，信噪比 17.5:1；
活体成像：Cy5 标记的肿瘤靶向纳米粒尾静脉注射小鼠后 6 小时，肿瘤部位荧光强度是正常组织的 8.3 倍，成像深度可达 1cm，清晰区分肿瘤边界。
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来源：https://www.med-life.cn/product/506394.html
