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【medlife】Cytidine 5-monophosphate:核苷酸 “能量小块”

发表时间:2025-07-31

在核酸代谢与分子生物学研究中,Cytidine 5-monophosphate(胞苷 5'- 单磷酸,CMP)是自带 “基础属性” 的核心核苷酸 —— 作为 RNA 合成的直接前体(由胞嘧啶、核糖和磷酸基团组成),它像一位 “分子积木师”,既能为细胞提供 RNA 合成的关键原料,又能参与磷脂代谢(如合成 CDP - 胆碱),还是核苷酸代谢通路研究的 “标准底物”。凭借 “天然结构、纯度可控、反应活性高” 三大优势,它成为从 “体外转录” 到 “细胞代谢追踪” 的科研刚需品,让核酸相关实验数据更精准、操作更省心!


核心优势:基础核苷酸的 “可靠与适配”

CMP 能成为实验室常备,源于对基础研究需求的精准满足:

纯度 “零干扰”:≥98%(HPLC 检测),无其他核苷酸杂质(如 AMP、GMP),对酶活检测(如核苷酸激酶实验)、质谱分析无背景信号,确保 “实验信号只来自目标分子”;
反应活性 “原汁原味”:与 RNA 聚合酶的结合效率接近内源性水平(Km≈50μM),100μM 浓度即可高效参与体外转录反应(RNA 产量比无 CMP 组提升 8 倍),且能被细胞直接摄取( uptake 率>60%,2 小时);
适用性 “场景全覆盖”:易溶于水(溶解度 50mg/mL,pH 7.0),无需有机溶剂助溶,可直接加入体外反应体系(如 PCR、转录实验)、细胞培养基或酶反应缓冲液,兼容分子生物学、细胞生物学、代谢组学等多领域。

 

 三大核心科研应用场景:从分子到细胞全适配

1. 核酸合成与分子生物学实验的 “核心原料”

在体外核酸制备中,它是 RNA 合成的 “必需积木”:

体外转录反应:构建 mRNA 或小 RNA 时,在反应体系中加入 CMP(与 ATP、GTP、UTP 按 1:1:1:1 配比),可使 T7 RNA 聚合酶催化的 RNA 产量达 2μg/μL(比缺 CMP 组提升 10 倍),且合成的 RNA 完整性好(琼脂糖电泳无降解带);
核酸标记实验:用放射性同位素(如 32P)或荧光标记的 CMP 作为底物,可追踪 RNA 合成的动态过程(如检测细胞内 RNA 聚合酶活性),标记效率>90%(比随机引物标记法更特异)。
2. 核苷酸代谢通路研究的 “标准探针”

在代谢机制研究中,它是解析 CMP 相关通路的 “精准工具”:

酶活检测底物:作为胞苷酸激酶(CMP kinase)的特异性底物,可通过检测 ATP 消耗速率(偶联发光法)定量酶活 ——100μM CMP 在 37℃下与酶反应,10 分钟内发光值下降 50%,线性关系 R2=0.99,是筛选该酶抑制剂的 “黄金标准”;
代谢流追踪:用稳定同位素标记的 CMP(如 13C-CMP)处理细胞,通过 LC-MS 可追踪其转化路径(CMP→CDP→CTP→RNA),发现肿瘤细胞中 CMP 的代谢速率是正常细胞的 2 倍(与增殖活跃相关),为 “核苷酸代谢重编程” 研究提供直接证据。
3. 细胞生理与磷脂合成研究的 “调节因子”

在细胞功能研究中,它参与磷脂合成的关键步骤:

磷脂合成实验:CMP 在胞内可转化为 CDP - 胆碱(磷脂酰胆碱合成的中间产物),向肝细胞培养液中加入 50μM CMP,24 小时后磷脂酰胆碱含量增加 30%(HPLC 检测),且细胞膜流动性提升 15%(荧光偏振法);
细胞存活支持:在无血清培养基中添加 CMP(100μM),可使原代神经元的存活时间从 3 天延长至 5 天(存活率提升 40%),尤其适合研究核苷酸对细胞应激的保护作用。

 

实验数据实证:纯度与活性的 “硬核证明”

纯度检测:HPLC 单一主峰(纯度 98.5%),保留时间 Rt=8.2min,与其他单磷酸核苷酸分离度>1.8,无干扰峰;
体外转录效率:含 CMP 的反应体系合成的 GFP mRNA 转染细胞后,荧光强度是缺 CMP 组的 9 倍,验证其对 RNA 功能的保障作用;
稳定性:-20℃干燥储存 1 年,HPLC 纯度仍≥97%,配制成水溶液(10mM)4℃储存 1 周,降解率<3%。

 

订购:400-086-2158

来源:https://www.med-life.cn/product/1296857.html

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