名称:HEPES
品牌: Medlife
CAS号:7365-45-9
纯度: ≥99.5%
货号:PC19372
规格:100g/价格:￥256.00
规格:500g/价格:￥879.00
链接:https://www.med-life.cn/product/540354.html
HEPES（化学名：4-(2 - 羟乙基)-1 - 哌嗪乙磺酸，CAS 号：7365-45-9）是无挥发性两性离子型缓冲试剂，为细胞培养体系核心缓冲原料，同时可作为溶酶体生物发生的诱导试剂，适配分子细胞、生化分析、体外孵育等各类科研场景。分子式C8H18N2O4S，分子量 238.30，科研级产品纯度≥99%，外观为白色结晶粉末。水溶性极佳，常温水中溶解度高，可直接配制高浓度母液；几乎不溶于丙酮、乙醚等有机溶剂。常温干燥密封储存即可，避光防潮条件下保质期可达 36 个月。HEPES 有效缓冲区间覆盖 pH 6.8~8.2，缓冲能力稳定，对比碳酸氢盐缓冲体系不存在 CO?挥发导致 pH 漂移问题；无细胞毒性、生物相容性优良；除缓冲功能外，高浓度 HEPES 可特异性诱导细胞内溶酶体生物发生、促进自噬溶酶体形成，理化性质稳定，批次缓冲性能一致，是细胞实验室常备基础试剂。
二、作用机制
作为两性离子缓冲体系，HEPES 分子同时带有弱酸性磺酸基团与弱碱性哌嗪氮基团，在 6.8–8.2pH 区间内可可逆结合、释放氢离子，抵御细胞代谢产酸、外源添加物质带来的 pH 波动；碳酸氢盐缓冲依赖培养箱 5% CO?平衡，HEPES 可脱离 CO?环境维持体系 pH 稳定，开盖操作、室温孵育、长时间显微活细胞成像时不会出现 pH 快速偏移。
在溶酶体诱导层面，高浓度 HEPES 干预可轻微调节胞内渗透压与囊泡转运信号，上调溶酶体生成相关转录因子与膜蛋白表达，促进早期内体成熟分化为功能性溶酶体，提升细胞内溶酶体数量与酸化水平，进而激活细胞自噬通路，常用来构建溶酶体发生、自噬流研究细胞模型。整体分子惰性强，不会干扰多数酶活、蛋白结合、荧光标记等生化反应体系。
三、主要应用领域
1、常规哺乳动物细胞培养缓冲
添加至 DMEM、RPMI 1640 等基础培养基，替代或搭配碳酸氢盐缓冲；活细胞长时间显微成像、体外转染、药物长时间孵育时稳定 pH，避免开盖后培养基酸化；适配肿瘤细胞、原代细胞、干细胞持续培养，维持细胞形态、增殖活性。
2、溶酶体生物发生与自噬机制研究
作为经典诱导剂上调溶酶体生成，用于观测溶酶体数量、形态、酸化程度变化；搭配溶酶体荧光探针、LC3 自噬标记蛋白，探究自噬流调控、自噬溶酶体融合过程；对比基因敲除 / 过表达细胞系对 HEPES 诱导溶酶体生成的响应差异，解析溶酶体发育调控通路。
3、体外酶活与生化反应缓冲体系
用于激酶、磷酸酶、蛋白酶等体外酶促反应配制缓冲液，中性偏弱碱区间稳定酶空间构象与催化活性；适配蛋白纯化、蛋白结合互作、免疫共沉淀孵育体系，不干扰抗原抗体结合。
4、病毒包装与转染实验
质粒转染、慢病毒 / 腺病毒包装阶段，稳定培养基 pH，降低 pH 波动对转染效率、病毒包装产量的负面影响；提升悬浮细胞、难转染细胞系的转染稳定性。
5、离体组织与器官孵育实验
脑组织切片、心肌组织、胰岛离体灌注培养，无 CO?水浴环境下长效稳定 pH，保障离体组织细胞生理活性，用于神经电生理、激素分泌离体检测。
6、电泳、色谱与分析化学配套缓冲
部分蛋白电泳、离子色谱、毛细管电泳中用作缓冲组分；适配荧光光谱、紫外吸收检测，自身无紫外干扰吸收峰，不干扰样品信号读取。
四、使用方法与注意事项
体外细胞常规缓冲配制：精准称量 HEPES 粉末溶于超纯水，用 NaOH 调节 pH 至 7.2–7.4，配制成 1 M 无菌母液，0.22μm 滤膜除菌，培养基常规添加终浓度 10–25 mM；诱导溶酶体发生工作终浓度一般 50–100 mM，根据细胞株做梯度摸索。
离体生化反应：依据反应适宜 pH 在 6.8–8.2 区间微调，配制对应浓度缓冲液；组织孵育体系参照细胞培养浓度梯度设置。
注意要点：高浓度（＞100 mM）长期处理会产生轻微渗透压压力，易抑制细胞增殖甚至引发应激凋亡，溶酶体诱导实验需严格设置浓度梯度对照；粉末吸湿能力强，开封后密封干燥存放，称量快速操作；本身无挥发性酸碱，但强碱强酸混合会破坏缓冲结构；仅科研实验使用，不可注射体内、不可食品医用添加；母液无菌过滤后 4℃冷藏短期存放，长期分装 - 20℃冻存；部分厌氧微生物体系缓冲适配性差，优先选用专用厌氧缓冲盐。
五、总结与展望
HEPES（CAS：7365-45-9）凭借宽范围稳定缓冲能力、无挥发、低毒生物相容、兼具溶酶体诱导双重功能，成为细胞生物学、生物化学实验室不可或缺的基础缓冲试剂。既解决了碳酸氢盐体系依赖 CO?、开盖 pH 易崩解的痛点，又可作为工具化合物搭建溶酶体与自噬研究细胞模型，覆盖细胞培养、自噬机理、酶活分析、转染病毒实验、离体组织培育等多元场景。
当前以 HEPES 为诱导手段的溶酶体、自噬课题广泛应用于神经退行性疾病、肿瘤代谢、衰老细胞研究；随着活细胞动态成像、细胞器互作机制研究持续深入，HEPES 将在长效活细胞观测、自噬通路药物筛选、干细胞稳定培养等方向持续发挥关键支撑作用，为各类细胞水平基础科研提供纯度稳定、缓冲性能均一的标准化缓冲原料。
