名称:HEPES缓冲液,0.5M，pH8.5
品牌:PERFEMIKER
货号:PA52899
规格:100ml/纯度:>0.5M，pH8.5/价格:￥156.00
规格:250ml/纯度:>0.5M，pH8.5/价格:￥291.00
链接:
https://www.perfemiker.cn/product/1433900.html
一、产品简介
0.5M HEPES 缓冲液（pH8.5）是以高纯 HEPES 为缓冲溶质，采用无 DNase、无 RNase 超纯水精准调配，经精密 pH 校准、无菌过滤制备而成的两性离子型即用型浓缩缓冲试剂，广泛应用于蛋白纯化、细胞裂解、免疫印迹、体外酶促反应、细胞转染、膜蛋白分离、电泳体系配制等分子生物学与生物化学科研场景。本品为无色澄清透明液体，无沉淀、无浑浊、无内毒素及蛋白酶污染，缓冲浓度、pH 值、离子强度批次间高度统一稳定，无需科研人员自行称量、溶解、调 pH、过滤灭菌，可根据实验需求稀释后直接使用。密封置于 2–8℃避光冷藏环境储存，远离强酸、强碱、高温环境，规范存放条件下稳定保质期可达 18 个月。
HEPES 属于有机两性缓冲试剂，相较于传统磷酸盐缓冲体系，不受二氧化碳浓度变化干扰，在 pH6.8~8.2 区间具备优异缓冲能力，本产品固定 pH8.5 高偏碱缓冲体系，适配碱性条件下蛋白结合、酶催化反应、核酸转染、膜蛋白提取等对酸碱度要求严苛的实验场景，可稳定维持反应体系 pH 不发生漂移，有效避免因 CO?溶解、底物代谢引发的体系酸化或碱化，保障各类生化反应、细胞体外处理实验结果稳定可重复。
二、作用机制
两性离子 pH 稳态缓冲机制：HEPES 分子带有可解离的氨基与磺酸基团，在设定 pH8.5 的弱碱性环境下，依靠质子的可逆结合与释放，快速中和反应体系中微量酸性、碱性代谢产物，抑制体系 pH 出现漂移，规避因酸碱度波动导致的酶蛋白失活、蛋白变性沉淀、抗原抗体结合效率下降等实验问题，长效维持生化反应体系酸碱稳态。
抗二氧化碳干扰稳定机制：磷酸盐缓冲液易受空气中 CO?溶于水形成碳酸导致 pH 下降，而 HEPES 属于有机缓冲体系，不与二氧化碳发生反应，开盖长时间操作、细胞孵育过程中 pH 基本无偏移，特别适合开放体系下长时间的蛋白孵育、转染、体外酶动力学实验。
生物相容性保护机制：缓冲体系不含重金属、去污剂等干扰杂质，不会破坏蛋白质高级空间结构、细胞膜完整性，对细胞、酶、抗体等生物大分子毒性极低，可在维持生物活性的前提下稳定反应环境，兼顾缓冲能力与生物兼容性。
高浓度浓缩稀释适配机制：0.5M 高浓缩规格可灵活按需稀释至实验所需工作浓度，适配从微量酶反应到大规模细胞裂解、蛋白粗提等多种实验场景，兼容性强，可与各类无机盐、保护剂、非离子型去污剂复配使用不发生析出。
三、主要应用领域
1、碱性条件下体外酶促反应体系构建
限制性酶切、激酶磷酸化、连接酶反应等需要弱碱性稳定环境的生化实验，依托缓冲体系稳定 pH，保证酶催化活性稳定。
2、细胞转染与细胞体外温和处理实验
脂质体转染缓冲体系配制，维持细胞膜表面电荷稳定，提升质粒、siRNA 向细胞内递送效率，降低转染过程中细胞应激损伤。
3、膜蛋白、可溶性蛋白提取纯化
作为细胞裂解基础缓冲液组分，稀释后搭配蛋白酶抑制剂使用，稳定蛋白天然构象，防止蛋白降解与酸碱变性。
4、免疫共沉淀、蛋白互作孵育体系
抗原抗体结合孵育缓冲液，稳定蛋白相互作用微环境，降低非特异性结合，减少实验背景杂带，提升检测信噪比。
5、电泳、色谱层析流动相前处理
离子交换、凝胶过滤蛋白层析缓冲液稀释母液，精准调控体系 pH 与离子强度，优化蛋白分离纯化效果。
6、生物化学、细胞生物学教学实训
缓冲溶液配制原理、酶活性影响因素探究、蛋白提取分离等实训课程，标准化缓冲液保证实验数据重复性优异。
四、使用方法与注意事项
使用方法：根据实验所需终浓度，将 0.5M HEPES（pH8.5）浓缩缓冲液用无菌超纯水稀释至工作浓度，可按需添加氯化钠、EDTA、蛋白酶抑制剂、甘油等保护试剂，混匀后即可用于酶促反应、细胞裂解、蛋白孵育、转染等实验操作。
注意要点：本品为无菌无酶缓冲液，建议在超净台内开盖使用，避免引入外源 RNase、DNase 造成后续核酸、蛋白实验污染；需 2–8℃避光冷藏保存，不可高温高压灭菌，高温会改变缓冲体系 pH 值，造成缓冲性能下降；不可与高浓度强酸、强碱直接混合，易超出缓冲容量引发 pH 剧烈偏移；溶液出现浑浊、沉淀、异味时说明试剂已污染变质，禁止继续使用；仅限实验室体外生化、细胞科研实验使用，不可用于人体静脉输注、临床制剂配制；废弃缓冲废液可按常规生化废液统一处理；多次反复开盖容易滋生微生物，建议小规格分装保存；不同批次 pH 与浓度经过统一校准，无需重复调试酸碱参数；弱碱性环境下长期放置易滋生微生物，稀释后的工作液建议现配现用。
五、总结与展望
0.5M HEPES 缓冲液（pH8.5）凭借抗 CO?干扰、弱碱性缓冲能力优异、生物相容性好、即用免配制、无酶无污染、批次 pH 与浓度精准稳定等优势，成为开放体系生化反应、细胞转染、蛋白纯化、膜生物实验领域的核心标准化缓冲试剂。有效解决磷酸盐缓冲液易酸化、自配缓冲液 pH 偏差大、酶活实验重复性差等科研痛点，为弱碱性条件下各类生物大分子实验提供稳定可靠的酸碱环境保障。
当前依托 HEPES 缓冲液搭建的酶活分析、蛋白分离、细胞转染、分子互作评价体系，持续支撑蛋白组学、基因功能验证、靶向药物体外筛选、细胞分子机制等热点科研课题。随着微量生化检测、高通量蛋白纯化、活体分子示踪技术不断发展，浓缩型标准化 HEPES 缓冲液将在弱碱性生化体系稳态调控、开放实验环境 pH 质控、生物大分子活性保护方面持续发挥核心缓冲作用，为生物化学、细胞生物学、药学方向基础科研与小试工艺优化提供 pH 精准、兼容性广、批次统一的两性离子缓冲科研保障。
